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第三部分 儀器分析法
第一章 紫外分光光度法 一、原理 可見光、紫外線照射某些物質，主要是由于物質分子中價電子能級躍遷對輻射的吸收，而產生化合物的可見紫外吸收光譜。基于物質對光的選擇性吸收的特性而建立分光光度法或稱吸收光譜法的分析方法。它是以朗伯──比耳定律為基礎。 1 朗伯-比耳定律 A = lg-- = ECL T 式中 A為吸收度； T為透光率； E為吸收系數，采用的表示方法是（E１％ １ｃｍ），其物理意義為當溶液濃度為1%（g/ml），液層厚度為1cm時的吸收度數值； C為100ml溶液中所含被測物質的重量（按干燥品或無水物計算），g； L為液層厚度，cm。 二、使用范圍 凡具有芳香環或共軛雙鍵結構的有機化合物，根據在特定吸收波長處所測得的吸收度，可用于藥品的鑒別、純度檢查及含量測定。 三、儀器 可見-紫外分光光度計。其應用波長范圍為200～400nm的紫外光區、400～850nm的可見光區。主要由輻射源（光源）、色散系統、檢測系統、吸收池、數據處理機、自動記錄器及顯示器等部件組成。 本儀器是根據相對測量的原理工作的，即先選定某一溶劑（或空氣、試樣）作為標準（空白或稱參比）溶液，并認為它的透光率為100％（或吸收度為0），而被測的試樣透光率（或吸收度）是相對于標準溶液而言，實際上就是由出射狹縫射出的單色光，分別通過被測試樣和標準溶液，這兩個光能量之比值，就是在一定波長下對于被測試樣的透光率（或吸收度）。 本儀器可精密測定具有芳香環或共軛雙鍵結構的有機化合物、有色物質或在適當條件下能與某些試劑作用生成有色物的物質。 使用前應校正測定波長并按儀器說明書進行操作。 四、儀器的校正 1.波長的準確度試驗 以儀器顯示的波長數值與單色光的實際波長值之間誤差表示，應在±1.0nm范圍內。 可用儀器中氘燈的486.02nm與656.10nm譜線進行校正。 2.吸收度的準確度試驗 3.雜散光的試驗 4.波長重現性試驗 5.分辨率試驗 五、測定方法 1.對照品比較法 （1）按各品種項下的方法，分別配制供試品溶液和對照品溶液，對照品溶液中所含被測成分的量應為供試品溶液中被測成分標示量的100±10%，所用溶劑也應完全一致，在規定的波長測定供試品溶液和對照品溶液的吸收度后，按下式計算含量，即得。 （2）計算式 A樣×G對/稀釋倍數×100×1 含量（%）= -------------- ×100% A對×G樣/稀釋倍數×100×1 2.吸收系數法 （1）按各品種項下的方法配制供試品溶液，在規定的波長處測定其吸收度，再以該品種在規定條件下的吸收系數計算含量。用本法測定時，應注意儀器的校正和檢定。 （2）計算式 A樣 含量（%）= --------------- ×100% G樣/稀釋倍數×(E１％ １ｃｍ)對×100×1 3.計算分光光度法 采用計算分光光度法應慎重。本法有多種，使用時均應按各品種項下規定的方法進行。當吸收度處在吸收曲線的陡然上升或下降的部位測定時，波長的微小變化可能對測定結果造成顯著影響，故對照品和供試品測試條件應盡可能一致。若測定時不用對照品，如維生素A測定法，則應在測定時對儀器作仔細的校正和檢定。 六、注意事項 1.空白溶液與供試品溶液必須澄清，不得有渾濁。如有渾濁，應預先過濾，并棄去初濾液。 2.測定時，除另有規定外，應以配制供試品溶液的同瓶溶劑為空白對照，采用1cm的石英吸收池。 3.在規定的吸收峰波長±2nm以內測試幾個點的吸收度，以核對供試品的吸收峰波長位置是否正確，除另有規定外，吸收峰波長應在該品種項下規定的波長±2nm以內；否則應考慮該試樣的真偽、純度以及儀器波長的準確度，并以吸收度最大的波長作為測定波長。 4.一般供試品溶液的吸收度讀數，以在0.3～0.7之間的誤差較小。 5.吸收池應選擇配對，否則要引入測定誤差。在規定波長下兩個吸收池的透光率相差小于0.5％的吸收池作配對，在必要的情況時，須在最終測量扣除吸收池間的誤差修正值。 6.由于吸收池和溶劑本身可能有空白吸收，因此測定供試品的吸收度后應減去空白讀數，再計算含量。 7.儀器的接地必須良好，一切裸露的零件對地電位不得超過24伏（測電筆的氖管不得發亮）。 8.在使用過程中，如需開啟試樣室蓋時或暫時停止測試時，必須及時推入光門鈕桿（使光電管前光門關閉），保護光電管，以防止光電管受強光或長時間照射而損壞。 9.在測定時或改測其它檢品時，應用待測溶液沖洗吸收池3～4次，用干凈綢布或擦鏡紙擦凈吸收池的透光面至不留斑痕（切忌把透光面磨損）。 10.取吸收池時，應拿毛玻璃兩面，切忌用手拿捏透光面，以免粘上油污。使用完后及時用測定溶劑沖凈，再用純化水沖凈，用干凈綢布或擦鏡紙擦干，晾干后，放入吸收池盒中，防塵保存。 11.若吸收池內外壁沾污，兩池差較大的處理。 （1）可用綢布纏在扁竹條外或用脫脂棉纏在細玻璃棒上蘸上乙醇，輕輕摩擦，再用純化水沖凈。 （2）如上述方法處理不好，必要時可用重鉻酸鉀-硫酸洗液泡洗1～2分鐘，用自來水沖凈，再用純化水沖凈。 （3）不得用毛刷刷洗或硬物拭擦，以防止表面光潔度受損影響正常使用。 12.請務必注意經常保持硅膠的干燥，目的是保護光學元件和光電放大器系統不致受潮損壞而影響儀器的正常工作，如發現有的硅膠由藍色變為粉紅色，應立即更換。該儀器干燥劑筒有兩個：一個是裝在放大器暗盒上，另一個裝在單色光器暗盒上。 13.在更換硅膠干燥劑時，應關閉切斷電源。 14.在停止工作期間，主機試樣室內應放入袋裝或筒裝硅膠干燥劑。用防塵罩罩住整個儀器，并在防塵罩內放數袋防潮硅膠。 15.儀器在操作中，狹縫的寬度應從小逐漸開大。若狹縫過大，由于進入光電管的光能量強度過大，將會使放大器輸出信號達到飽和，以至數字顯示出溢出（即數字閃爍或示1不變）。這不是儀器有故障。 16.將波長旋轉放在625nm，鋏縫關閉在0.02nm附近，選擇按鍵恢復在停止工作部位（即三個鍵均彈出）。 17.搬動儀器時應搬在主體端，不要搬在試樣室和光電管盒端以及光源燈室部位，以防止儀器狹縫或光路部件受力而發生變形。并在搬動或運輸時，應將可動部分固定，如各旋鈕可用膠布貼住，狹縫位置開大些，然后固定，不要關小狹縫，以免運輸時振動使狹縫刀口受損壞。 18.儀器的光柵、反射鏡絕對不能擦拭，否則將損壞儀器光學表面，增加雜散光。 19.儀器經過搬動請及時檢查并糾正波長精度，為保證測定的準確性請經常校準波長精度。如有異常，應立即報告質量保證部，但不得擅自調整，并及時做好記錄。 七、結果計算 A E１％ １ｃｍ（供試品） = -- CL E１％ １ｃｍ（供試品）
含量（%）= ----------- ×100% E１％ １ｃｍ（標準值或對照品） 八、允許差 儀器分析方法的誤差限度，除另有規定外，其相對偏差應在±(2.0～3.0)%。 第二章 比色法 一、原理及適用范圍 在可見光區，除某些物質有吸收外，很多物質本身并沒有吸收，但可在一定條件下加入顯色試劑或經過處理使其顯色后，根據顏色深淺與濃度成正比關系，則可用比色法測定含量。 二、儀器 可見分光光度計（或比色計）其應用波長范圍為400～850nm的可見光區。主要由輻射源（光源）、色散系統（或濾光片）、檢測器系統、顯示系統、記錄器及吸收池等部件組成。使用前應校正測定波長并按儀器說明書進行操作。 三、儀器的校正 按照紫外分光光度法項下的有關規定及按儀器說明書要求進行校正。波長的準確度應在±3nm范圍內。 四、測定方法 1.用比色法測定時，應取對照品同時操作。除另有規定外，比色法所用的空白系指用同體積的溶劑代替對照品或供試品溶液，然后依次加入等量的相應試劑，并用同樣方法處理。在規定的波長處測定對照品和供試品溶液的吸收度后，按紫外分光光度法項下"對照品比較法"的計算式計算含量。 2.當吸收度和濃度關系不呈線性時，應取數份梯度量的對照品溶液，用溶劑補充至同一體積，顯色后測定各份溶液的吸收度，然后以吸收度與相應的濃度繪制標準曲線，再根據供試品的吸收度在標準曲線上求出其含量。 三、注意事項 測定時，應取對照品平行操作，使所用試劑用量、反應溫度、酸堿度、反應時間等完全一致，對隨時間變化影響顯色的品種應準確控制讀數時間，操作時應注意避光。 第三章 高效液相色譜法 一、原理 高效液相色譜法是用高壓輸液泵將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相，壓入裝有固定相的色譜柱，經進樣閥注入供試品，由流動相帶入柱內，在柱內各成分被分離后，依次進入檢測器，色譜信號由記錄儀或積分儀記錄。 二、適用范圍 高效液相色譜法是一種分離分析方法，適用于揮發性低、熱穩定性差、分子量大的高分子化合物以及離子型化合物等的定性、定量分析。中國藥典主要用于藥品的含量測定、有關物質檢查、雜質限度檢查和鑒別等。 三、儀器 高效液相色譜儀主要由輸液泵系統、進樣器系統、色譜柱、檢測器、記錄器、顯示器及數據處理機（或兼有組分收集系統）等組成。使用時應按儀器的說明書進行操作。 四、儀器的校正 1.高效液相色譜儀的柱箱控溫精度、基線噪聲、基線漂移、靈敏度或檢測限、線性范圍的檢定均按儀器說明書的技術要求進行校驗，應符合規定。 2.以紫外-可見光檢測器、熒光檢測器、差示折光檢測器為檢測器的實驗室通用液相色譜儀的檢定，所用各種標準物質應使用經國家技術監督部門批準頒發的標準物質。具體校正方法和主要技術指標見"高效液相色譜儀檢測器的校驗"。 3.泵的耐壓試驗 4.泵流量設定值誤差、流量穩定性誤差的試驗 5.柱恒溫箱溫度設定值誤差和控溫穩定性誤差的試驗 6.梯度準確度的試驗 7.定性定量重現性的試驗 五、對儀器的一般要求 1.色譜柱的填充劑和流動相的組分應按各品種項下的規定。常用的色譜柱填充劑有硅膠（正相色譜）和化學鍵合硅膠，后者以十八烷基硅烷鍵合硅膠（反相色譜）最為常用，辛基硅烷鍵合硅膠次之，氰基或氨基鍵合硅膠也有使用。離子交換填充劑用于離子交換色譜；凝膠或玻璃微球等填充劑用于分子排阻色譜等。除另有規定外，柱溫為室溫，檢測器為紫外吸收檢測器。 2.藥典正文中各品種項下規定的條件除固定相種類、流動相組分、檢測器類型不得任意改變外，其余如色譜柱內徑、長度、固定相牌號、載體粒度、流動相流速、混合流動相各組分的比例、柱溫、進樣量、檢測器的靈敏度等，均可適當改變，以適應具體品種并達到系統適用性試驗的要求。 3.一般色譜圖約于20分鐘內記錄完畢。 六、系統適用性試驗 按各品種項下要求對儀器進行適用性試驗，即用規定的對照品對儀器進行試驗和調整，應達到規定的要求，或規定分析狀態下色譜柱的最小理論板數、分離度、重復性和拖尾因子。 1.色譜柱的理論板數（n） n = 5.54(tR/Wh/2)2 式中 tR為保留時間（以分鐘或長度計，下同，但應取相同單位）； Wh/2為半峰高寬。 2.分離度（R） 除另有規定外，分離度應大于1.5。 2(tR2－tR1) R = ----- W1＋W2 式中 tR2為相鄰兩峰中后一峰的保留時間； tR1為相鄰兩峰中前一峰的保留時間； W1及W2為此相鄰兩峰的峰寬。 3.重復性 取各品種項下的對照溶液，連續進樣5次，除另有規定外，其峰面積測量值的相對標準偏差應不大于2.0%。也可按各品種校正因子測定項下，配制相當于80%、100%和120%的對照品溶液，加入規定量的內標溶液，配成3種不同濃度的溶液，分別進樣3次，計算平均校正因子，其相對標準偏差也應不大于2.0%。 4.拖尾因子（T） 除另有規定外，T應在0.95～1.05之間。 W0.05h
T = --- 2d1 式中 W0.05h為0.05峰高處的峰寬； d1為峰極大至峰前沿之間的距離。 七、測定法 定量測定時，可根據供試品的具體情況采用峰面積法或峰高法。測定雜質含量時，須采用峰面積法。 （一）內標法 加校正因子測定供試品中某個雜質或主成分含量 1.按各品種項下的規定，精密稱（量）取對照品和內標物質，分別配成溶液，精密量取各溶液，配成校正因子測定用的對照溶液。取一定量注入液相色譜儀，記錄色譜圖。測量對照品和內標物質的峰面積或峰高，按下式計算校正因子： AS/CS 校正因子（f）= --- AR/CR 式中 AS為內標物質的峰面積或峰高； AR為對照品的峰面積或峰高； CS為內標物質的濃度； CR為對照品的濃度。 再取各品種項下含有內標物質的供試品溶液，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，測量供試品中待測成分（或其雜質）和內標物質的峰面積或峰高，按下式計算含量： AX 含量（CX）= f·--- AS/CS CX×稀釋倍數
含量（%）= -------- ×100% GX×(1－干燥失重) 式中 AX為供試品（或其雜質）的峰面積或峰高； CX為供試品（或其雜質）的濃度； GX為供試品的稱樣量。 當配制校正因子測定用的對照溶液和含有內標物質的供試品溶液使用同一份內標物質溶液時，則配制內標物質溶液不必精密稱（量）取。 2.內標物質的選擇 （1）內標物質應是樣品中不含有的組分，否則會使峰重疊而無法準確測量內標物質的峰面積。 （2）內標物質的保留時間應與待測成分相近，并達到完全分離，分離度R≥1.5。 （3）內標物質必須是純度符合要求的化合物，若非純品無干擾峰也可采用。已知含量的較純物質也可用，但需扣除內標物質的重量。 （二）外標法 測定供試品中某個雜質或主成分含量 1.按各品種項下的規定，精密稱（量）取對照品和供試品，配制成溶液，分別精密取一定量，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，測量對照品和供試品待測成分的峰面積（或峰高），按下式計算含量： AX 含量（CX）= CR·-- AR CX×稀釋倍數
含量（%）= -------- ×100% GX×(1－干燥失重) 2.由于微量注射器不易精確控制進樣量，當采用外標法測定供試品中某雜質或主成分含量時，以定量環進樣為好。 （三）加校正因子的主成分自身對照法 （四）不加校正因子的主成分自身對照法 （五）面積歸一化法 由于峰面積歸一化法測定誤差大，因此，本法通常只能用于粗略考察供試品中的雜質含量。除另有規定外，一般不宜用于微量雜質的檢查。方法是測量各雜質峰的面積和色譜圖上除溶劑峰以外的總色譜峰面積，計算各峰面積占總峰面積的百分率，即得。 八、注意事項 1.雖然泵能耐壓6000PSI的壓力，但不要使泵處于4000PSI以上的壓力為宜。 2.安裝及拆卸色譜柱時應注意柱的連接方向，千萬不能接反。否則可能導致柱效降低，甚至損壞色譜柱。 3.嚴禁開空泵。在無流動相通過時不要扳動進樣閥的操作桿，使用時要注意盡可能少扳動，以免磨損內部的密封墊圈。 4.為了延長檢測器燈源的使用壽命，在色譜泵穩定后再打開檢測器電源開關，分析結束后立即關閉檢測器。 5.應使用高純度、高質量的溶劑和試劑。 6.避免pH值超限，pH值應控制在2.2～7.5之間。pH值偏低或偏高都會腐蝕液相系統的不銹鋼材料；破壞色譜柱填料的結構，使填料失活。 7.色譜柱溫不能超過規定要求，柱溫過高會加速色譜柱填料老化，破壞其結構。 8.使用所有溶劑必須是互溶的。這對于緩沖流動相來說是非常重要的，鹽類的析出會很快損壞要維護的部件。 9.流動相首選甲醇-水系統，如經試用不適合時，再選用其他溶劑。為保護儀器，應盡可能少用含有緩沖液的流動相。如果流動相中含有緩沖劑，每日使用后應用不含緩沖劑的流動相或新鮮純化水將儀器管路、泵、進樣閥、色譜柱及檢測池等充分沖洗干凈。 10.如果液相系統使用未過濾的洗脫液、注入未過濾的樣品、系統中滯留緩沖洗脫液都能堵塞系統或劃傷泵柱塞。所以流動相、樣品使用前必須用0.45μm微孔濾膜過濾；流動相并先經脫氣處理后使用。停泵后決不允許緩沖洗脫液滯留在系統中，須用經過濾后的新鮮純化水進行清洗，并保證將緩沖劑沖洗干凈。 11.如果泵閉置在2天以上，應將甲醇注滿液相系統，以避免水溶劑系統中可能存在微生物的繁殖。 12.色譜柱保存時應使填充劑處在潤濕狀態，兩端密塞。反相柱（如十八烷基硅烷鍵合硅膠柱）可在甲醇中保存；正相柱（如硅膠柱）可在正己烷中保存等。 13.決不能使用鹽酸溶液。一般來說，任何濃度的鹵化物都會腐蝕未經鈍化的不銹鋼材料。 14.盡量避免使用在電化學過程中引起腐蝕的金屬離子。應避免的典型金屬離子有錳、鉻、鋅、銅、鎳、鉬、鐵。 九、允許差 含量測定的精度，除另有規定外，其相對標準偏差應不大于2.0%。 第四章 氣相色譜法 一、原理 氣相色譜法的流動相為氣體，稱為載氣；色譜柱分為填充柱和毛細管柱兩種。填充柱內裝吸附劑、高分子多孔小球或涂漬固定液的載體；毛細管柱內壁涂漬或交聯固定液。注入進樣口的供試品被加熱氣化，并被載氣帶入色譜柱，在柱內各成分被分離后先后進入檢測器，色譜信號用記錄儀或數據處理器記錄。 二、適用范圍 氣相色譜法是一種分離分析方法，適用于含揮發性或經裂解、衍生化等能氣化的藥品及多組分混合物的定性、定量分析。中國藥典主要用于原料藥中殘留溶劑、揮發性雜質的檢查，制劑中含有乙醇量的測定以及具有一定揮發性原料藥及其制劑的含量測定。 三、儀器 氣相色譜儀主要由氣路系統、進樣系統、色譜柱、檢測器、記錄器、顯示器及數據處理機（或兼有組分收集系統）等組成。使用時應按儀器的說明書進行操作。 四、對儀器的一般要求 1.除另有規定外，載氣為氮氣；色譜柱為填充柱或毛細管柱，填充柱的材質為不銹鋼或玻璃，載體用直徑為0.25～0.18mm、0.18～0.15mm或0.15～0.125mm經酸洗并硅烷化處理的硅藻土或高分子多孔小球；常用玻璃或彈性石英毛細管柱的內徑為0.20mm或0.32mm。進樣口溫度應高于柱溫30～50℃；進樣量一般不超過數微升；柱徑越細進樣量應越少。檢測器為氫火焰離子化檢測器，檢測溫度一般高于柱溫，并不得低于100℃，以免水氣凝結，通常為250～350℃。 2.藥典正文中各品種項下規定的條件，除檢測器種類、固定液品種及特殊指定的色譜柱材料不得任意改變外，其余如色譜柱內徑、長度、載體牌號、粒度、固定液涂布濃度、載氣流速、柱溫、進樣量、檢測器的靈敏度等，均可適當改變，以適應具體品種并符合系統適用性試驗的要求。一般色譜圖約于30分鐘內記錄完畢。 五、系統適用性試驗 同高效液相色譜法項下規定。 六、測定法 1. 同高效液相色譜法項下規定。用氣相色譜法進行定量分析時，應盡量采用內標法為宜。同時也要注意進樣技術的熟練，因內標物質與供試品成分的蒸氣壓不同，則蒸氣壓高的進樣量也會較多。故選擇測定用內標物質時，除應考慮內標峰的保留時間應與被測成分相近，無雜質峰重疊，尚要考慮其蒸氣壓是否近似。 2.氣相色譜法手工進樣量不易精確控制，特別應注意留針時間和室溫的影響。 七、允許差 含量測定的精度，除另有規定外，其相對標準偏差應不大于2.0%。 第五章 旋光度測定法 一、定義 偏振光透過長1dm并每1ml中含有旋光性物質1g的溶液，在一定波長與溫度下測得的旋光度稱為比旋度。測定比旋度（或旋光度）可以區別或檢查某些藥品的純雜程度，亦可用以測定含量。 二、原理 當一單色光（鈉光譜的D線即589.3nm）通過起偏鏡產生直線偏振光向前進行，當通過裝有含有某些光學活性（即旋光性）的化合物液體的測定管時，偏振光的平面（偏振面）就會向左或向右旋轉一定的角度，即該旋光性物質的旋光度。其值可以從自動示數盤上直接讀出。 偏振光透過長1dm并每1ml中含有旋光性物質1g的溶液，在一定波長與溫度下測得的旋光度稱為比旋度。 α 對液體供試品 [α]ｔ Ｄ= --- ld 100α 對固體供試品 [α]ｔ Ｄ= --- lc 式中 [α]ｔ Ｄ為比旋度； D為鈉光譜的D線； t為測定時的溫度； l為測定管長度，dm； α為測得的旋光度； d為液體的相對密度； c為每100ml溶液中含有被測物質的重量，g（按干燥品或無水物計算）。 三、測定方法 1.打開穩壓電源開關，稍等片刻，俟電壓表指針穩定地指示在220V處。 2.打開旋光儀電源開關，經5分鐘鈉光燈發光穩定后再工作。 3.扳上直流開關，若直流開關扳上后，燈熄滅，則再將直流開關上下重復扳動1到2次，使鈉燈在直流下點亮為正常。 4.將測定管用供試品所用的溶劑沖洗3～4遍，緩緩注入適量溶劑。 5.測定管中若有氣泡，應先將氣泡浮在凸頸處，通光面兩端的霧狀液滴，應用擦鏡紙揩干。 6.測定管螺帽不宜旋得過緊，以免產生應力，影響讀數。 7.將測定管放入樣品室，測定管安放時，應注意標記的位置和方向，蓋上箱蓋。 8.打開示數，調節零位手輪，使旋光示值為零。 9.取出測定管，將空白溶液倒出，用供試品溶液沖洗3～4遍，將供試品溶液緩緩注入測定管，用擦鏡紙擦凈測定管，特別要擦凈兩端的通光面，按相同的位置和方向正確地放入樣品室內，蓋好箱蓋。 10.示數盤將轉出該樣品的旋光度。示數盤上紅色示值為左旋（－），黑色示值為右旋（＋）。 11.逐次按下復測按鈕，重復讀取旋光度3次，取3次的平均值作為測定結果。 12.如果樣品超過測量范圍，儀器在±45處自動停止，此時取出測定管，按一下復測按鈕開關，儀器即轉回零位。 13.鈉燈在直流供電系統出現故障不能使用時，儀器也可在鈉燈交流供電的情況下測試。但儀器的性能可能略有降低。 14.測定完畢后，取出測定管，將測定管用純化水洗凈。應晾干，防塵保存。 15.關閉"示數"開關，示數盤復原。 16.關閉"直流"及"電源"開關。 17.關閉穩壓電源開關，關閉總電源開關。 18.罩好防塵罩，填寫操作記錄。 四、注意事項 1.中國藥典2000年版二部規定，用鈉光譜的D線（589.3nm）測定旋光度，除另有規定外，測定管長度為1dm（如使用其他管長，應進行換算），測定溫度為20℃。 2.配制溶液及測定時,均應調節溫度至20±0.5℃（或各藥品項下規定的溫度）。 3.供試的液體或固體物質的溶液應不顯渾濁或含有混懸的小粒。如有上述情況時，應預先濾過，并棄去初濾液。 4.每次測定前應以溶劑作空白校正，測定后，再校正1次，以確定在測定時零點有無變動，如第2次校正時發現零點有變動，則應重新測定旋光度。 5.測定供試品與空白校正，應按相同的位置和方向放置測定管于儀器樣品室，并注意測定管內不應有氣泡，否則影響測定的準確度。 6.測定管使用后，尤其在盛放有機溶劑后,必須立即洗凈，以免橡皮圈受損發粘。測定管每次洗滌后，切不可置烘箱中干燥，以免發生變形，橡皮圈發粘。 7.測定管兩端的通光面，使用時須特別小心，避免碰撞和觸摸，只能以擦鏡紙揩試，以防磨損。應保護其光亮、清潔，否則影響測定結果。 8.測定管螺帽不宜旋得過緊，以免產生應力，影響讀數。 9.鈉燈使用時間一般勿連續使用超過2小時，并不宜經常開關。當關熄鈉燈后，如果要繼續使用，應等鈉燈冷后再開。 10儀器應放置干燥通風處，防止潮氣侵蝕，鎮流器應注意散熱。搬動儀器應小心輕放，避免震動。 11.光源積灰或損壞，可打開機殼擦凈或更換。 12.機械部分摩擦阻力增大，可以打開后門板，在傘形齒輪、蝸輪蝸桿處加稍許鐘油。 13.如果儀器發現停轉或其它元件損壞的故障，應按電原理圖詳細檢查。 第六章 pH值的測定法 一、原理 PHS-2型酸度計是用玻璃電極作為測量電極，甘汞電極作為參考電極，當氫離子濃度發生變化時，玻璃電極和甘汞電極之間的電動勢也隨著引起變化，而電勢變化符合能斯特方程式： RT E=Eo-2.3026×---×pH F 式中 E-產生的電極電位 T-絕對溫度 Eo-零電位 F-法拉第常數 R-氣體常數 pH-表示被測溶液pH值和內溶液pH值的差值 PHS-2型酸度計是利用玻璃電極和甘汞電極對被測溶液中不同酸度產生的直流電勢，輸入到一臺用參量振蕩深度負反饋的直流放大器，以達到pH值指示的目的。 二、注意事項 1.應注意玻璃電極裝到電極夾中時應略高于甘汞電極，以免球膜與試杯相碰。 2.新使用或久放未用的玻璃電極在使用前應放在純化水內浸泡活化48小時，平時也最好浸泡在水中，以便下次使用時能迅速地工作。 3.將甘汞電極的頸端橡皮塞取下，檢查飽和氯化鉀溶液情況，溶液中應有氯化鉀結晶析出，以確保溶液飽和，太少應予以添加。使用前應把電極彎管下端橡皮套除去。 4.按下電源按鍵，接通電源，按下pH按鍵，指示燈亮后，一般短時間測量，只需預熱數分鐘即可，但要保持儀表零點穩定，必須預熱半小時或一小時以上。 5.本儀器應置于干燥環境中，無顯著振動和強電磁場干擾，并防止灰塵及腐蝕性氣體侵入。 6.每次使用，在校正及測定前后均應用純化水將電極充分洗凈。 7.測定前校正儀器時，應選擇與待測溶液pH值接近的標準pH緩沖液，pH值相差不應超過3個單位。 8.為了使測定結果可靠，在測定時用標準pH緩沖液校正儀器后，應再用另一種相差約3個單位pH的標準緩沖液復校之。 9.待測溶液，校正液與電極的溫度應相同或相近，差異最好不超過2℃。 10.儀器的電表應避免震動與打擊，不用或移動時，將pH-mV分檔開關置于"0"處，以減少擺動。 11.溫度補償器轉動時勿用力過大，以防止移動緊固螺絲的位置，影響pH準確度。 12.對于pH大于9的溶液的測定，應使用231型鋰玻璃電極測定；使用有堿誤的電極測定時，應校正堿誤。 13.玻璃電極在測定堿性溶液時，應盡量快速，測定強堿溶液后，電極性能常不能立即復原，可在1mol/L鹽酸溶液中浸泡，再使用純化水沖洗，有時甚至需在酸液內浸泡幾小時，才能復原。 14.玻璃電極球泡很薄，因此在使用時勿與玻璃杯及硬物相碰，防止球泡破碎。 15.玻璃電極球泡勿接觸污物，勿用手去摸電極球泡，以免玻璃膜沾上油脂，影響電極測量精度。如發現沾污可用醫用棉花輕擦球泡部分，或用0.1mol/L稀鹽酸清洗之，再用純化水沖洗干凈。 16.玻璃電極插頭必須防止沾上水，保證插頭絕緣阻抗。 17.玻璃電極和甘汞電極在使用時，必須注意內電極與球泡之間及內電極和陶瓷芯之間是否有氣泡停留，如有則必須排除。 18.玻璃電極球泡有裂紋，或老化（使用或久放二年以上），則應調換新的電極，否則測量時反應遲鈍，甚至造成較大的測量誤差，新的電極（或干放一段時間后的電極）在使用之前需在純化水內浸一晝夜。 19.玻璃電極在常規情況下只能保存、使用一年。 20.配制標準pH緩沖液與溶解供試品的純化水,應是新沸過的冷純化水,其pH值應為5.5～7.0。 21.pH9的標準緩沖液應裝在聚乙烯瓶中密封保存。 22.標準緩沖液一般可保存2～3個月 ，但發現有混濁、發霉或沉淀等現象時，不能繼續使用。 23.對弱緩沖液（如純化水或注射用水）的pH值測定，先用鄰苯二甲酸氫鉀標準緩沖液校正儀器后測定供試液,并重取供試液再測，直至pH值的讀數在1分鐘內改變不超過±0.05為止；然后再用硼砂標準液校正儀器，再如上法測定，二次pH值的讀數相差應不超過0.1，取二次讀數的平均值為其pH值。 24.當發現讀數有緩慢變化時，可以拆開底板用電吹風等工具加熱讀數開關，使讀數開關干燥，但溫度不得超過60℃。 |
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