免疫組化的陰性、陽(yáng)性對(duì)照

　　陰性對(duì)照

　　陰性對(duì)照主要是為了排除陽(yáng)性結(jié)果是否存在內(nèi)源性生物素、內(nèi)源性過(guò)氧化物酶和其他的非特異性著色。

　　在日常工作中最常見(jiàn)的是采用緩沖液替代一抗的方法。當(dāng)抗體濃度過(guò)高、抗原修復(fù)過(guò)度、檢測(cè)系統(tǒng)與一抗?jié)舛炔黄ヅ涞仍驎r(shí)，也會(huì)出現(xiàn)非特異性著色，因此，選擇替代法陰性對(duì)照和用該抗體在正常濃度下不表達(dá)的組織（肝、腎組織存在很多的內(nèi)源性生物素，有部分抗原修復(fù)過(guò)度或抗體濃度過(guò)高時(shí)，也會(huì)出現(xiàn)非特異性著色，可作為陰性對(duì)照組織的一種）做成陰性對(duì)照，與被檢組織一起染色。

　　陽(yáng)性對(duì)照

　　陽(yáng)性對(duì)照又分自身對(duì)照和已知陽(yáng)性組織對(duì)照。

　　自身對(duì)照是指被檢組織內(nèi)存在已知抗原的正常組織，自身對(duì)照結(jié)果陽(yáng)性，說(shuō)明本次實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程是正確的，使用的抗體也是正確的，但不代表抗體稀釋比是正確的，因?yàn)樽陨韺?duì)照的組織都是正常組織，抗原表達(dá)很強(qiáng)，用很低的抗體濃度，就能有很好的表達(dá)，而腫瘤抗原通常表達(dá)都較弱，往往需要正常的稀釋比才能正確表達(dá)，如果抗體濃度低，會(huì)出現(xiàn)假陰性的結(jié)果。

　　已知陽(yáng)性組織對(duì)照是選擇結(jié)果強(qiáng)陽(yáng)性的腫瘤組織做陽(yáng)性對(duì)照片，效果和自身陽(yáng)性對(duì)照也是一樣的。