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在檢驗科生化室工作，熟知儀器的工作原理，定標、質控結果的判讀，異常警報的分析及處理是必須掌握知識，對我們的日常工作有著非常重要的作用。下面分享一例質控失控、定標失敗，通過結果判讀分析原因，并成功解決的案例。

今天，在對P800生化分析儀項目進行常規質控時，發現無機磷（P）備用瓶質控結果嚴重偏低，質控品為朗道定值質控，分為高值和低值兩個水平。對當前瓶和備用瓶進行質控時，使用的是同一批號，同一天復溶的質控品。但是，P當前瓶在控，備用瓶遠超過3sd。

基于P備用瓶的高值和低值質控都失控，考慮檢測單元異常，即①水質，②透光窗，③反應杯，④試劑，⑤試劑針\樣本針吸取異常等。

綜合其他項目均在控，優先考慮試劑問題。于是我決定對備用瓶試劑進行定標，形成新的校準曲線，再做質控。

結果，再次定標后，在定標界面顯示“failed”，P備用瓶項目發紅，即定標失敗。

在校準報告頁觀察，可見S1處，Std1主副波長吸光度差值異常，并有“Dup”報警信息。

想到之前老師講課時說道，Dup報警信息即Duplication Limit，是重復性界限報警，原因為同一濃度，兩次重復測試的吸光度差值超出設定范圍。此警報在S1（即0濃度）時，考慮①氣泡②光源③試劑狀態④水質，等。

此例中，其他指控項目均在控，其他定標項目均通過，開機自檢時光源正常，則考慮試劑狀態問題。

我隨后停機，更換備用瓶P試劑盒，掃描試劑后重新定標。

伴隨著我緊張的心情，點開定標報告界面，終于定標通過了！

隨后，對P的備用瓶進行兩個水平的質控，結果也均在控。

通過此例，我在下班后回想、復習了之前老師講過的關于生化分析儀定標判讀的知識：

1、生化分析儀的基本原理就是朗伯比爾定律，即A=εLc  。

A為吸光度，ε為摩爾吸光系數，L是反應系統的光徑，c為溶液濃度。

對于固定的物質，它的ε是固定的，一個反應系統的L也是固定的，所以，測得A，即可求得c濃度。

2、以我們用的羅氏為例，主要分析類型有2 point End（兩點終點法），1 point End（一點終點法），Rate A（速率A法），2 point Rate（兩點速率法）。

其中，一點終點法，讀取終點的吸光度；

兩點終點法，讀取終點的吸光度，并能去除樣本空白的影響；

速率A法，讀取一段時間內吸光度的變化率；

兩點速率法，讀取兩個時間點的吸光度，計算吸光度變化率，不受曲線線性約束。

3、對于定標結果的判讀，我們首先要知道，儀器實測的是物質的吸光度/光量子數，而定標曲線就是一個橋梁，也是一把尺子。將實測的吸光度/光量子數轉化為待測物濃度，這就是儀器的作用和原理。

如上，S1為0濃度，S2為定標品濃度。兩個濃度的計算吸光度為定標時形成定標曲線所用，參考吸光度不使用。上圖，無報警信息，求得了K值，代表定標成功，但是還要通過質控這一關。

而定標失敗時，會有主要四類定標參數，下面簡單回顧定標參數的意義。

在我們生化室的日常工作中，熟知定標、質控的意義，常用項目的反應曲線，了解常見的定標參數意義和報警信息，對于解決日常遇到的問題有著非常大的意義。正如此例，通過定標報告的判讀，可以最快速度找到定標失敗、質控失控的原因，及時糾正，節省了時間成本，同時也保證了檢驗報告的準確和及時發出，不耽誤患者的就診。