大家在日常工作中是不是會發現生化儀器出現負值，筆者我值班也老遇到這種情況。首先我們要明白它是怎么計算的，就是著名的朗伯-比爾定律，吸光度和物質濃度呈線性關系。通常來說是K值與所測得的OD值相乘得來的，而這里測得的OD值是你測得的OD值之差，也就是反應完成后OD值減去試劑空白OD值減去杯子的吸光度。 而關于檢測負數結果，無外乎這四種情況：
1. 反應完成后的OD值小于試劑空白的OD值。這有兩種情況，第一反應是副反應，這個需要你調整參數。如果不是副反應的話，看看是不是試劑空白的問題，馬上做一個試劑空白，再加做標本，結果很可能可信。如果此次試劑空白跟前幾次的試劑空白相差較大的話，可能試劑污染，需要更換新的試劑。
2. 很肯能是病人標本有基質效應，影響測定，可以將病人的標本稀釋，減低基質的影響。
3. 可能結果偏低接近于0，做個空白就可以解決
4. 病人標本存在黃疸和脂血的時候也常常出現負值。黃疸的病人只需稀釋重做，如果是脂血則需要超速離心后取透明血清重做。
對于以上四種情況，后三種情況也好判定，對于第一種涉及到生化分析儀項目的檢測方式，選用的方法，反應曲線特點，所以必須要弄清原理，才能清晰定位找到癥結所在。
是單試劑加入反應杯后或者試劑與樣本混合后即刻測定第一個吸光度值，作為背景，用于計算，然后孵育一段設定好的時間后讀取結束點的吸光度值，這樣兩個相減去就是用于計算的吸光度值，用于濃度的計算。
在反應的測試位置處測定反應混合物的OD值 通常是終點法，其特點是反應到終點，待測物質全部變為顯色物質，吸光度不再變化。但還有些時候，待測物質濃度比較高，結果試劑耗盡，也到了終點，但此時的終點就不再是待測物質的終點，這種就是試劑耗盡，這種結果并不準確。這就是終點法中的吸光度限制:吸光度達到一定程度之后，儀器會出現報警，說明檢測結果可能有異常。
一般用于雙試劑系統中，R1與樣本孵育一段時間后讀取某一點的吸光度作為第一個吸光度值，在加入R2后孵育一段時間反應完畢，讀取另一個吸光度值，兩者相減用于濃度計算。其優點是可以最大限度的保證試劑的性能穩定性，在輕微的脂濁、黃疸等情況下得到比單試劑更為準確的結果，因為乳糜顆粒、膽紅素等作為“惰性”成分，反應前后是沒有變化的，因此兩次相減可以抵消這部分的干擾。
R1V: 第一試劑分配量 R2V:第二試劑分配量 P0:第一點試劑OD值 PZ：分配第二試劑前的OD值 PX:分配第二試劑后的OD 值
這種終點法要求樣品空白判斷，作為空白通道在分配第二試劑前減去OD 值，分配第二次試劑后從測定中減去空白通道中的OD值。減去與血清濁度和污染相關的數據，以便獲得更精確的測定結果。
單試劑或者雙試劑都行，在整個反應有個延遲期，然后進入0級反應期，表現是反應曲線呈現一個非常直的上升或下降曲線，這樣，選取時間段內的任意兩點曲線都能計算物質的濃度或者活性，機器一般建議選用三個點以上用于計算。一是可以探知有沒有發生底物耗盡及試劑質量，另外就是兩個計算點間距離越長結果越穩定，就是重復性好或者精密度高。速率法一般用于酶的測定，因為酶是個催化過程，在整個反應過程中的濃度是不變的，因此催化后吸光度的變化是均勻的。
該法用最小平方法計算光電測定每兩點之間吸光度變化，確定每分鐘吸光度的變化率。
也叫固定時間法，也算是速率法的一種，一般用于1級動力學的反應，在時間-吸光度曲線上選擇兩個測光點，此兩點既非反應初始吸光度，亦非終點吸光度，這兩點的吸光度差值用于結果計算。即樣品和試劑混合后分別讀取延滯期后的吸光度和反應一定時間的吸光度，然后比較標準和測定的值，計算待測物質的濃度。
實際上可以說本質上生化就兩種方法，一點法，兩點法，平均速率法都是終點法和速率法 兩種原理的衍生方法而已，本質沒有區別。所以對于我們實驗室人員而言，到底選擇兩點終點法還是兩點速率法很關鍵，兩者在用于計算的數值不一樣，像終點法一般是直接用1到2個點的吸光度就可以計算的，而速率法用于計算的點會很多，還要算斜率，定標曲線和終點法算的不一樣，儀器針對兩種方式的報警提示一般也不同 。所以對于方法的選取，還是該用速率法的用速率法，如果方法選錯的話，對于一些異?；蛘咛厥獾臉吮緯尫磻€特點和普通標本有差異，從而導致結果有差異。本文為醫家小二首發，作者：康婷芬轉載需獲授權
了解更多資訊
