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槲皮素（Quercetin）又稱櫟精，是植物中最常見的黃酮類物質。從大多數蔬菜、水果以及中草藥中都能提取分離槲皮素[1]，特別在洋蔥和沙棘中槲皮素含量較高。研究表明槲皮素具有多種藥理作用，包括抗腫瘤、抗病毒、抗炎、抗血栓以及止咳平喘等[2-4]。在臨床研究方面，槲皮素主要用于治療糖尿病和過敏性疾病，以及預防腫瘤、降血壓和保護心血管等。槲皮素作為一種天然的抗氧化劑，具有廣闊的應用前景。本文在體外條件下對其抗氧化活性進行檢測和評價，對槲皮素的工業應用和臨床使用具有指導意義。 再次，網絡傳播中的自由性、開放性與狂歡要求的客觀環境相吻合。狂歡生活是在“廣場”上進行的。“廣場”不僅是一個具體的場所，而且是大眾性、民間性舞臺的隱喻。網絡傳播的自由與開放的屬性體現在每個網民自由地進行信息選擇與交流，這使得網絡傳播與以往的傳統媒體不同，具有強烈的民間色彩。這種民間色彩滿足了狂歡的大眾性和民間化特征。 1 實驗方法1.1 DPPH 法化學名1，1- 二苯基-2- 三硝基苯肼，其溶液在517 nm 處有最大吸收值，且與濃度呈線性關系。抗氧化劑能夠結合或替代DPPH，使溶液吸光度變小，通過檢測517 nm 的吸光度值計算物質的抗氧化能力。取試管編號為0 至6，將0 號試管作為空白對照，其余試管依次加入5 mM、2.5 mM、1.25 mM、0.62 mM、0.31 mM和0.15 mM的槲皮素溶液50 μl。每只試管按表1 加入各組分，混勻后靜置30 min。95%乙醇調零，測定各管517 nm的吸光度值。計算自由基清除率：  （A 為各組吸光度值，A0 為對照組吸光度值） 表1 試劑添加量  槲皮素 DPPH（40 ?g/ml） 95%乙醇 對照組 0 μl 2 ml 1 ml 實驗組 50 μl 2 ml 950 μl 1.2 CUPRAC 法抗氧化物能將反應體系中的二價銅離子（Cu2+）還原為亞銅離子（Cu+）。亞銅離子與新亞銅試劑結合形成一種絡合物，在450 nm 處有最大吸收峰。通過測定樣品450 nm 的吸光度值，來評價其還原銅離子的能力。取試管編號為0 至6。將0 號試管作為調零組加入100 μl 95%乙醇，1-6 號試管分別加入不同濃度槲皮素溶液100 μl，每管分別加入1 ml 5 mM CuSO4 溶液、1 ml 3.75 mM 新亞銅試劑、1 ml 乙酸銨溶液和1 ml 純水。混勻后放置30 min 使試劑充分反應，測定各管在450 nm 的吸光度值。 1.3 β- 胡蘿卜素/亞油酸體系法乳化的亞油酸能夠自我氧化產生大量自由基，使β- 胡蘿卜素褪色。抗氧化劑則能延緩褪色過程。向反應體系中加入樣品，記錄不同時間下反應體系470 nm 的吸光度值，可計算樣品對脂質氧化的抑制率。取1.21 mg/ml 的β- 胡蘿卜素- 氯仿溶液0.5 ml、0.5 g/ml 的亞油酸- 氯仿溶液0.2 ml 和0.5 g/ml 吐溫40- 氯仿溶液1 ml 加入250 ml 圓底燒瓶，40℃旋轉蒸發2 min 除去氯仿，加入100 ml 蒸餾水混勻得到β- 胡蘿卜素- 亞油酸溶液。取0.5 g/ml 的亞油酸- 氯仿溶液0.2 ml 和0.5 g/ml吐溫40- 氯仿溶液1 ml 加入250 ml 圓底燒瓶，40℃旋轉蒸發2 min 除去氯仿，加入100 ml 蒸餾水混勻得到亞油酸溶液。取45 ml β- 胡蘿卜素- 亞油酸溶液和4 ml pH 7.0 磷酸鹽緩沖液混勻得到反應介質溶液。 人工智能的技術革命，帶動的是勞動法的革命，影響是巨大而深遠的。一種觀點認為，人工智能的興盛帶來的卻是勞動法的衰落，一個直接原因是勞動法旨在保護的勞動者數量減少。當然這僅是表達了對未來的憂慮，現實未必那么糟糕。然而無論如何，面對人工智能帶來的沖擊波，勞動法不能原地踏步，而應做出有效的回應。 取六只試管分兩組，分別編號為0、1、2。將0 號試管作為調零組加入亞油酸溶液。1 號試管為對照組加入0.1 ml 的乙醇溶液，2 號試管為實驗組加入0.1 ml 的5 mM槲皮素溶液，每管分別加入4ml 的反應介質溶液。第一組試管加樣完畢后混勻，測定溶液470 nm 的吸光度值。第二組試管加樣完畢后混勻，50℃水浴中孵育180 min，測定其470 nm 的吸光度值。計算槲皮素對脂質過氧化的抑制率：  （A0 和A00 分別表示在t=0 時刻樣品和對照組的吸光度） 1.4 抗氧化活性影響因素將槲皮素溶液分別放置不同時間、溫度、pH 和紫外照射條件下，用DPPH 法測定各因素對槲皮素清除自由基能力的影響。 2 實驗結果2.1 清除自由基能力槲皮素具有良好的清除DPPH 自由基的能力。隨著槲皮素濃度增加其清除自由基能力顯著增加，在濃度高于1.25 mM后，清除能力增加減緩。在2.5 mM至0.15625 mM濃度范圍內其自由基清除能力與抗壞血酸相似，但在高于5 mM濃度時，其清除自由基能力弱于抗壞血酸。 2.2 還原金屬銅離子能力槲皮素具有較好的還原金屬銅離子的能力。隨著槲皮素濃度增加其還原銅離子能力逐漸增加。在0.15 mM至2.5 mM濃度范圍內槲皮素還原能力與沒食子酸相同，但在高于5 mM濃度時，其清除能力顯著低于沒食子酸。 2.3 抑制脂質過氧化能力在470 nm 處分別測得各管0 min 和180 min 的吸光度值，結果見表2。根據抑制率公式計算得出5 mM的槲皮素對脂質過氧化的抑制率達到85.7%。表明槲皮素具有良好的抑制脂質過氧化能力。 2.2.1 建成區擴展數量和強度 德州市主要建成區從1997年的85.39 km2增加到2017年的151.56 km2，凈增長面積達66.17 km2，增加了1.77倍，平均年增長3.30 km2（見表2）． 表2 吸光度值  對照組 實驗組 0 min 0.078 0.075 150 min 0.071 0.074 2.4 抗氧化活性影響因素將槲皮素稀釋至濃度為1.25 mM，4℃避光保存。隨著保存時間的增加，槲皮素清除自由基能力逐漸下降，存放30 d 后，其清除能力下降約17%；將1.25 mM的槲皮素溶液置于不同溫度下孵育24 h，結果顯示在低于20℃條件下，其清除能力并無明顯變化，隨著溫度逐漸增加，其清除能力顯著降低，75℃條件下清除能力降低約10%；紫外照射24 h 對槲皮素自由基清除能力無影響；pH 對槲皮素自由基清除能力影響較大，在pH 2.0 時清除率約為30%，隨著pH 增加其清除能力逐漸增加，在pH 為5-6 時達到最大清除能力，約為60%，隨著pH 繼續增加其清除能力急劇降低，在pH 9.0 時，清除率僅為10%。 3 結論通過DPPH 自由基清除實驗、銅離子還原能力測定以及抑制脂質過氧化實驗，證明槲皮素在體外條件下具有良好的抗氧化活性，可作為有效的抗氧化劑使用；時間和溫度是影響槲皮素抗氧化活性的重要因素，提示我們在應用中一方面要現用現配，另一方面對配制好的槲皮素溶液要低溫保存，來避免其抗氧化活性的喪失；為了充分發揮槲皮素的抗氧化作用，應將其pH 維持在5.0 至6.0 之間。 式中：E為容積功率耗散，W/m3；ρ為水的密度，取1000 kg/m3；B為過魚池寬度，取3 m；h為水池中的平均水深，取1 m；L為過魚池長度，取4 m；d為隔板厚度，取0.3 m；Δ h為隔板水位差，取0.051 m。 參考文獻 [1]康淑荷.中國天然植物中槲皮素提取工藝綜述[J].化學世界，2017，58(10)：624-630 [2]Hirpara K V， Aggarwal P， Mukherjee A J， et al. Quercetin and its derivatives： synthesis， pharmacological uses with special emphasis on anti-tumor properties and prodrug with enhanced bio-availability [J].Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry，2009，9(2)：138-61. [3]Liao Y R， Lin J Y. Quercetin， but not its metabolite quercetin-3-glucuronide， exerts prophylactic immunostimulatory activity and therapeutic antiinflammatory effects on lipopolysaccharide-treated mouse peritoneal macrophages ex vivo[J].J Agric Food Chem， 2014， 62(13)：2872-2880. [4]李聰，胡強，張燕翔，王超.槲皮素的藥理學活性研究進展[J].湖北中醫雜志，2018(6)：63-66. |
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